Онкогены ретровирусов птиц

с молекулярной массой 36 кд в нормальных и опухолевых клетках, его локализации и т. д. , недостаточно, чтобы сделать однозначное заключение о роли этого белка в трансформации. Ряд клеточных белков, еще менее охарактеризованных, также подвергаются фосфорилированию по тирозину протеинкиназой ВСР. Эти данные свидетельствуют в пользу плейотропности (множественности) действия протеинкиназ вирусных онкогенов, что практически не оставляет надежды на возможность обнаружения в клетке единственной и высокоспецифичной мишени для «атаки» онкобелками.

Наличие моноспецифических сывороток к индивидуальным белковым компонентам цитоскелета нормальных и опухолевых клеток позволило приступить к изучению процессов фосфорилиро-вания актина, миозина, тубулина, а-актина, филамина, виментина и винкулина. Из перечисленных белков только винкулин можно рассматривать как потенциальную мишень действия pp60^vsrc in vivo. Винкулин — белок с молекулярной массой 130 кд — обнаруживается в участках адгезии клетки к субстрату; вероятно, он выполняет существенную роль в формировании фенотипа нормальных клеток [David-Pfeuty Т. , Singer S. _t 1980]. В трансформированных же клетках винкулин в результате фосфорили-рования протеинкиназой ВСР перераспределяется, что приводит к нарушению структуры участков адгезии клеточной мембраны к субстрату. Трансформация клеток, как правило, сопровождается десятикратным увеличением уровня фосфорилирования винкулина по тирозиновым остаткам, однако это составляет только 1 % от общего количества белка в клетке [Sefton В. et al.
, 1981]. Использование для трансформации температурочувствительных мутантов ВСР (ts-мутантов) подтвердило предположение о причастности ррбО к фосфорилированию винкулин*. Куриные фибробласты, трансформированные температурочувствительным мутантом ВСР ts68 (вирус имеет ts-мутацию в гене src, что сопровождается утратой ррбО^{4 src} способности трансформировать и поддерживать трансформированный фенотип клеток) при непер-миссивной температуре (41 °С), имели нормальный фенотип. Реверсия клеток в нормальный фенотип при сдвиге температуры с 41 °С до 37 °С сопровождалась упорядочением структур цитоскелета и снижением уровня фосфорилирования винкулина по тирозиновым остаткам до нормального [David-Pfeuty Т. , Singer S. , 1980; Sefton В. et al. , 1981]. Тем не менее фосфорили-рование винкулина онкобелком ВСР не может рассматриваться как прямое доказательство участия винкулина в нарушении функции цитоскелета клеток. Надо заметить, что изменение характера и уровня фосфорилирования винкулина не является характерной особенностью трансформации клеток и другими агентами. Так, фосфорилирование винкулина по тирозину не изменяется в процессе трансформации клеток химическими канцерогенами, онкогенными ДНК-содержащими вирусами и даже виру-