Онкогены ретровирусов птиц

В pp60^{v src} имеется два основных сайта фосфорилирования се-рина: один располагается в 17-й позиции аминокислотных последовательностей, местоположение другого определено менее точно. Единичный фосфотирозиновый остаток занимает позицию 419 у ВСР Шмидта—Руппина и 416 — у ВСР Прага. Не исключая возможной ошибки в определении локализации фосфорилирован-ного тирозина, ряд авторов подчеркивают, что аминокислотные последовательности онкобелка, окружающие положение фосфоти-розина указанных вирусов, идентичны [Levinson A. et a!. , 1981; Neil J. et al. , 1981; Bishop J. , Varmus H. , 1982]. Аминокислотные последовательности, окружающие сайт фосфорилирования тирозина в других белках (включая онкобелки ретровирусов, среднего Т-антигена вируса полиомы и клеточных белков фосфорилирован-ных pp60^vsrc), также оказались весьма близкими друг другу и содержат только одну замену, а именно аминокислоты аргинина на глутамин [Levinson A. et al. , 1981; Neil J. et al. , 1981]. По-видимому, этот сайт фосфорилирования тирозина «атакуется» одним и тем же классом протеинкиназ.

Аминотерминальный домен pp60^vsrc с молекулярной массой около 8 кд осуществляет связывание белка с плазматической мембраной [Levinson A. et al. , 1981]. Напротив, карбокситерми-нальный домен с молекулярной массой 30 кд осуществляет про-теинкиназную функцию, и активность этого фрагмента белка значительно выше, чем у нативной формы pp60^{v src}. Возможно, что определенные функции аминотерминального домена pp60^vsrc (т. е. фосфорилирование серинов) регулируют как кинетическую характеристику белка, так и субстратоспециальность киназной активности, вероятно, при помощи аллостерического эффекта [Bishop J. . Varmus H.
, 1982].

Локализация ррбО¹'^src в клетке. В клетках, трансформированных ВСР, продукт гена src ассоциирован с рядом субклеточных компонентов. Исключением в этом отношении является лишь ядро. Большинство молекул pp60^{v sri} в инфицированных клетках связано с плазматическими мембранами, что было определено методами иммунофлюоресцентной и иммуноэлектронной микроскопии, а также посредством биохимических характеристик клеточных органелл [Willingham M. et al. , 1979; Erikson E. , Erikson R. , 1980; Levinson A. et al. , 1981; Bishop J. , Varmus H. , 1982]. Большое количество трансформирующего белка сосредоточено в области контакта плазматических мембран опухолевых клеток друг с другом и их прикрепления к подложке-субстрату [Willingham М. et al. , 1979].

Предполагается, что pp60^{v src} в клеточной мембране связан с липидным слоем. Однако этот факт нуждается в уточнении при помощи методов, не требующих прижизненной фиксации клеток.

Синтез pp60^vsrc осуществляется на свободных полирибосомах [Eisenman R. , Vogt V. , 1978; Bishop J. , Varmus H. , 1982], и уже