Взаимодействие нитрозосоединений с нуклеиновыми кислотами

1-метиладенина может быть искусственно увеличено в некоторой степени благодаря соответствующим потерям 3- и 7-метилпуринов путем депуринизации в ходе продолжительных периодов реакции.

Биологическое действие продуктов а л к и-лирования. Мискодируюшие свойства алкили-рованных оснований. Одно из главных биологических свойств N-нитрозосоеди нений — их мутагенность [Lawley P. , 1974; Montesano R. , Bartsch H. , 1976]. Это предполагает, что индуцированное алкилированием изменение в последовательности оснований ДНК могло бы быть ответственным за инициацию неоплазии. В большинстве случаев места алкилирования оснований ДНК локализуются в пределах областей молекулы, подчиняющихся правилу спаривания оснований по Уотсону—Крику. Данный факт стимулировал исследования по выявлению возможных мискодирующих свойств этих модификаций. Способность модифицированных оснований вмешиваться в спаривание оснований зависит, однако, от разнообразных факторов, особенно от способности к образованию стабильной пары оснований с комплементарными или некомплементарными основаниями.
В некоторых случаях природа мутаций, вызванная этими агентами, указывала, какие именно основания ДНК вовлечены.

Поскольку пока еще невозможно изменять мискодирующий эффект in vivo, были разработаны различные in vitro методы для бесклеточного синтеза полипептидов или полинуклеотидов с использованием синтетических матриц, содержащих модифицированные (измененные) основания. Удалось установить, что присутствие 7-метилгуанина в ДНК не ведет к мискодирующим событиям. Кроме того, данные опытов in vivo показывали, что наличие 7-метилгуанина в ДНК обычно не стимулирует процессы репарации.

Демонстрация алкилирования О^ь в гуанине и предсказанное свойство продукта вызывать ошибочное спаривание породили гипотезу, что 0⁶-алкилгуанин мог бы иметь отношение к канцерогенному и мутагенному эффектам N-нитрозосоединений [Loveless А. , 1969). Это было подкреплено результатами опытов, в которых кополимеры, содержащие цитидиловую и 0⁶-метил-гуаниловую кислоты, были использованы как матрицы для РНК-полимеразы; наблюдавшееся аномальное включение УМФ и в меньшей степени АМФ привело к заключению, что О^е-метил-гуанин не образует стабильной пары оснований с цитозином. Однако при использовании индуцированной этилметансульфона-том реверсии бактериофага было найдено, что частота мутаций, индуцированных в специфическом локусе для каждого присутствующего 0⁶-этилгуанина, была примерно 0,35. В соответствии с этой величиной эффективность мискодинга О^е-метилгуанина в кополимерах ДНК была определена и достигала примерно 40 %, если концентрации мононуклеотидов не ограничивали скорость полидезоксирибонуклеотидного синтеза. Однако, когда концентра-